用來掃描液相熒光標(biāo)記物發(fā)出的熒光光譜的儀器統(tǒng)稱為熒光分光光度計(jì)。它可以提供多種物理參數(shù)，如激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等，從不同角度反映分子的鍵合和結(jié)構(gòu)。通過對這些參數(shù)的測量，可以推斷出分子在各種環(huán)境中的構(gòu)象變化，當(dāng)然也可以進(jìn)行一般的定量分析，從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
熒光分光光度計(jì)的發(fā)展經(jīng)歷了三個(gè)階段：
1、手動(dòng)控制熒光分光光度計(jì)
2、自動(dòng)記錄熒光分光光度計(jì)
3、計(jì)算機(jī)控制熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)按照光束多少又可分為雙光束熒光分光光度計(jì)和單光束熒光分光光度計(jì)兩大系列。另一些是低溫激光Sh p ol‘s技術(shù)熒光分光光度計(jì)，配備壽命和相位分辨率熒光分光光度計(jì)等。
熒光分光光度計(jì)的工作原理：高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射進(jìn)樣品池，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)射熒光。經(jīng)過濾波和反射后，熒光被光電倍增管接收，然后以圖形或圖形的形式顯示出來。由于分子結(jié)構(gòu)的不同，不同物質(zhì)激發(fā)態(tài)能級的分布有其不同的特點(diǎn)。這一特性反映在熒光中。各種物質(zhì)都有其特有的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜，因此可以利用不同的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜對物質(zhì)進(jìn)行定性鑒別。
